Tecido antimicrobiano: métodos de teste e padrões da indústria

O acabamento antimicrobiano de tecidos é um tratamento prático para tecidos de proteção. Ele utiliza diversos métodos para testar seu desempenho. Este artigo aborda métodos para testando têxteis. Estuda métodos qualitativos e quantitativos para avaliar como os tecidos combatem germes. Também analisa os principais fatores que afetam os resultados dos testes antimicrobianos em tecidos. Usar os procedimentos corretos e ferramentas de teste confiáveis ​​é crucial para obter resultados precisos.

Seleção de microrganismos de teste

As cepas microbianas para testar o desempenho antimicrobiano em tecidos incluem bactérias e fungos. Quando se trata de bactérias, focamos em cepas Gram-positivas e Gram-negativas. Fungos, bolores e dermatófitos são as escolhas típicas. Para verificar a eficácia antimicrobiana de amostras têxteis, escolha microrganismos relevantes e representativos. As cepas na Tabela 1 são comuns na natureza. Você pode encontrá-las na pele e nas membranas mucosas humanas. Isso as torna ótimas para testar tecidos antimicrobianos. Para obter resultados precisos, escolha os organismos de teste corretos. Também é importante usar ferramentas padronizadas de teste têxtil.

Microrganismos representativos usados ​​em testes têxteis

Staphylococcus aureus é uma bactéria altamente resiliente que não forma esporos. É uma cepa Gram-positiva comum usada em testes têxteis. Pesquisadores reconhecem o Bacillus subtilis por sua forte resistência devido à formação de esporos. Ele frequentemente serve como exemplo de bactéria formadora de esporos. O Bacillus megaterium é um patógeno formador de esporos. É comumente usado em testes têxteis por pesquisadores.
Escherichia coli é uma bactéria Gram-negativa presente em diversos ambientes naturais. É um padrão comum em muitos protocolos de testes têxteis. A norma chinesa (GB2423.16-81) lista fungos como Aspergillus flavus e Chaetomium globosum para testes de resistência a mofo. Esses fungos são frequentemente usados ​​para replicar a exposição real a mofo em tecidos e polímeros.
Candida albicans é uma levedura que pode causar infecções. Geralmente reside na pele e nas membranas mucosas humanas. É frequentemente utilizada em testes têxteis antimicrobianos. Isso ocorre porque responde bem a medicamentos e tem o formato de uma colônia, semelhante ao de uma bactéria. Isso facilita a contagem e a observação durante os testes. Suas características fúngicas especiais e seu comportamento de colônia a tornam uma boa escolha para testes padrão com ferramentas têxteis modernas.

Teste de tecidos antimicrobianos de amplo espectro em têxteis

Para verificar se um tecido antimicrobiano funciona contra muitos germes, use uma mistura de micróbios. Essa cultura deve conter cepas específicas em quantidades determinadas. Atualmente, pesquisadores estão testando muitos produtos antimicrobianos com três organismos padrão: Staphylococcus aureus (Gram-positivo), Escherichia coli (Gram-negativo) e Candida albicans (fungo). Esse método oferece uma visão geral, mas não revela completamente como os tecidos combatem os micróbios na vida real.
Em testes têxteis com fungos, a contagem de unidades formadoras de colônias pode ser difícil. Isso se deve à forma como os fungos crescem. Frequentemente, verificamos o desempenho antifúngico medindo o crescimento fúngico na amostra têxtil. Isso ocorre após alguém mantê-la em temperatura e umidade controladas. A avaliação utiliza um sistema de classificação da Norma Britânica BS6085-81. Esse sistema ajuda a avaliar a resistência a fungos. Procedimentos consistentes são essenciais para obter resultados confiáveis. Você também precisa de ferramentas avançadas de teste têxtil. Essas ferramentas imitam as condições ambientais e rastreiam a atividade microbiana nas superfícies do tecido com precisão.

Desempenho de tecido antimicrobiano Métodos de Teste

Verificamos como os tecidos combatem germes usando três testes: qualitativo, semiquantitativo e quantitativo. Cada método é importante para verificar a eficácia dos tratamentos antimicrobianos em tecidos. Eles diferem em precisão e aplicação.

Métodos de Teste Qualitativos

• Os métodos qualitativos de testes têxteis incluem:
• Método de teste AATCC 90 (teste de halo)
• JIS Z2911-1981 (Teste Antimicrobiano)
• AATCC 30 (Avaliação de resistência antifúngica e à podridão)
• GB/T 20944.1-2007 (Têxteis — Método de difusão em ágar para atividade antibacteriana)

Os métodos de teste têxtil geralmente envolvem a aplicação de organismos de teste no tecido. Em seguida, é realizada uma inspeção visual para verificar o crescimento microbiano. A avaliação verifica a eficiência da transferência dos agentes antimicrobianos do tecido para o ágar. Este método é ótimo para acabamentos lixiviáveis. No entanto, não é adequado para tratamentos duráveis ​​e resistentes à lavagem.

As vantagens incluem baixo custo e resultados rápidos. Métodos qualitativos não fornecem uma medição precisa da atividade antimicrobiana. Como resultado, os resultados carecem de números precisos. Para obter resultados precisos e uniformes no desenvolvimento de produtos ou no controle de qualidade, muitas vezes são necessárias ferramentas avançadas de teste têxtil. Pesquisadores as utilizam para testes de acompanhamento que se baseiam em métodos quantitativos.

Método de teste AATCC 90

O teste AATCC 90 é um teste têxtil rápido. É usado principalmente para avaliar a eficácia de agentes antimicrobianos. O processo começa com a adição das bactérias de teste a um meio de ágar. Em seguida, coloque a amostra de tecido diretamente sobre a superfície. Após incubar a 37 °C por 24 horas, verifique o crescimento microbiano. Use uma lupa para ver o tamanho da zona de inibição ao redor do tecido. Esses resultados são então comparados com uma amostra de controle.
Este método é simples, rápido e pode lidar com muitas amostras de uma só vez. Mas também apresenta limitações. O tempo de incubação é definido, mas a concentração do inóculo bacteriano não é clara. Isso pode levar a resultados inconsistentes. O tamanho da zona de inibição mostra a eficácia da dispersão do agente. Também indica sua eficácia contra micróbios. Isso é útil para comparação com um tecido de referência. Mas não é uma maneira confiável de medir quantitativamente a atividade antimicrobiana. Especialistas sugerem o uso de ferramentas adicionais de teste têxtil e métodos mensuráveis ​​para melhores avaliações.

Método de pulverização AATCC 90

O Método de Pulverização AATCC 90 é uma versão modificada do teste têxtil AATCC 90 original. Após a incubação, borrifamos uma quantidade definida de reagente TNT na amostra de tecido. Em seguida, verificamos a eficácia do antimicrobiano observando o crescimento bacteriano na amostra.
A mudança de cor ocorre devido a uma reação bioquímica. A succinato desidrogenase da bactéria em teste reduz o reagente TNT. Isso leva à formação de um pigmento vermelho insolúvel. Essa mudança de cor indica que as bactérias estão ativas. Também nos ajuda a verificar a eficácia da amostra no combate aos germes.
Este método de teste têxtil tem uma grande vantagem. Ele pode detectar o crescimento bacteriano, mesmo sem uma zona de inibição visível ao redor da amostra. A atividade bacteriana na superfície do ágar causa uma coloração vermelha. Essa alteração ajuda a avaliar a eficácia do antimicrobiano. Seu design visual claro facilita o uso. Portanto, é uma ferramenta de triagem útil. Você pode usá-lo com outros dispositivos de teste têxtil para uma melhor análise.

Método Colorimétrico AATCC 90

O Método Colorimétrico AATCC 90 baseia-se no teste têxtil AATCC 90 original. Ele fornece uma maneira semiquantitativa de avaliar a cor. Após a incubação, lave as bactérias da amostra têxtil. Em seguida, adicione uma certa quantidade de reagente TNT à suspensão bacteriana para iniciar a reação de cor. Após 15 minutos, um espectrofotômetro mede a absorbância a 525 nm. Este valor de absorbância se correlaciona com o número de bactérias viáveis ​​presentes.
Este método ajuda a medir o desempenho antimicrobiano melhor do que depender de observações visuais. Este método não funcionará para organismos que não produzem succinato desidrogenase. O reagente TNT precisa dessa enzima para a reação de coloração.
Para resultados precisos e repetíveis, especialmente em medições, este método requer controle preciso. Ferramentas confiáveis ​​para testes têxteis, como espectrofotômetros calibrados, são essenciais em laboratórios de teste.

Método de teste antifúngico JIS Z2911

O método JIS Z2911 testa a resistência dos tecidos ao mofo. É uma das primeiras formas padronizadas de medir as propriedades antifúngicas. A ideia principal é pulverizar uma solução de esporos misturados uniformemente. Faça isso tanto na amostra de tecido quanto no meio de cultura. Incubamos as amostras em condições controladas. Verificamos o crescimento de mofo em intervalos regulares durante o tempo definido.
A quantidade de mofo que cresce determina a eficácia antifúngica do tecido. Este método oferece uma maneira clara de testar a resistência de tecidos a fungos. Ele se concentra em materiais que os pesquisadores usarão em áreas úmidas e propensas a micróbios.
Para garantir precisão e repetibilidade, utilize métodos consistentes e ferramentas especiais de teste têxtil. Isso é importante, especialmente ao verificar acabamentos ou revestimentos resistentes.

Método de teste AATCC 30

Pesquisadores utilizam o teste AATCC 30 para verificar a resistência dos materiais têxteis ao mofo e ao apodrecimento. Ele determina a eficácia dos biocidas na prevenção do crescimento de fungos e da degradação dos materiais.
O método tem algumas abordagens:

• Método de enterramento do solo
• Método de placa de ágar
• Método do frasco de umidade

O método de enterramento no solo envolve a colocação de amostras de tecido de determinados tamanhos no solo por um período determinado. Em seguida, medimos sua resistência à ruptura. A perda de resistência à ruptura indica a resistência do material ao ataque de fungos.
O método da placa de ágar avalia a resistência dos tecidos ao crescimento de fungos. Neste método, utiliza-se uma placa de ágar com meio de cultura. Em seguida, inocula-se uma suspensão aquosa de esporos de Aspergillus. Discos de tecido tratados com um agente umectante não iônico são colocados na placa. Eles também são tratados com a suspensão de esporos. Após a incubação a uma temperatura específica, verificamos a quantidade de mofo que cresceu no tecido. Avaliamos isso observando a área coberta pelo fungo.
O método do pote de umidade utiliza tiras de tecido tratado. Essas tiras são penduradas em um pote de boca larga. O pote contém uma quantidade definida de água misturada com uma concentração específica de esporos de fungos. Eles mantêm a estrutura a uma determinada temperatura. Em seguida, verificamos as tiras de tecido para verificar se há crescimento visível de mofo. Examinamos a área coberta pelo mofo.

GB/T 20944.1-2007 – Têxteis: Avaliação da atividade antibacteriana, Parte 1: Método de placa de difusão em ágar

Este padrão é a maneira mais recente de testar a resistência de tecidos a bactérias. Despeje duas camadas de meio de ágar em uma placa de Petri. Primeiro, adicione uma camada de base estéril. Em seguida, despeje uma camada superior inoculada. Alguém coloca a amostra de tecido sobre as duas camadas.
Após um tempo de incubação definido, verificamos a eficácia do tecido no combate às bactérias. Fazemos isso observando a quantidade de crescimento bacteriano onde a amostra entra em contato com o meio de ágar.

Método de Teste Semiquantitativo

O método de listras paralelas é um teste semiquantitativo popular. Ele verifica a resistência dos tecidos a bactérias. Este método oferece uma maneira rápida e fácil de testar a eficácia do tratamento de tecidos contra germes. É ótimo para tecidos com agentes antimicrobianos difusíveis. Serve como uma alternativa mais simples ao teste AATCC 100, mais complexo.
O AATCC 147 é um método de teste padrão para avaliar acabamentos antimicrobianos em tecidos. Os pesquisadores o conhecem como um método semiquantitativo para testes têxteis. Neste procedimento, coletamos um volume específico de uma suspensão bacteriana. Esta geralmente contém esporos de Staphylococcus aureus. Em seguida, inoculamos a amostra em uma placa de ágar nutriente, fazendo cinco estrias paralelas. Posicione a amostra de tecido sobre as estrias em um ângulo reto. Pressione-a suavemente para garantir que ela entre em contato próximo com a superfície do ágar. Após a incubação, medimos a atividade antimicrobiana do tecido. Fazemos isso verificando a largura das zonas de inibição ao redor das estrias que tocam o tecido.
Este teste têxtil é eficiente e confiável. É ótimo para controle de qualidade e para o desenvolvimento de tecidos antimicrobianos.

Métodos de Teste Quantitativos

Método de frasco agitado: rápido, mas limitado a antimicrobianos não lixiviantes

Atualmente, o método do frasco agitado e o método de absorção são as principais maneiras de testar a resistência dos tecidos às bactérias.
O método do frasco agitador coloca uma amostra têxtil em uma suspensão bacteriana. Em seguida, a mistura é agitada. Isso garante um bom contato entre o agente antimicrobiano do tecido e os microrganismos. A variação na contagem de bactérias viáveis ​​antes e depois da agitação demonstra a eficácia antibacteriana.

Método de absorção: demorado, mas mais preciso e versátil

O método de absorção requer um volume definido de suspensão bacteriana. Isso se aplica tanto à amostra com agentes antimicrobianos quanto ao controle não tratado. Após a incubação, enxágue ambas as amostras com a solução de eluição. Conte as bactérias viáveis ​​no eluente. Em seguida, verifique a atividade antimicrobiana. Observe a variação na contagem bacteriana antes e depois da incubação.
O método do frasco agitado não é simples. Funciona principalmente com tecidos antimicrobianos não lixiviantes. O método de absorção leva mais tempo. No entanto, funciona bem tanto para tecidos antimicrobianos lixiviantes quanto para tecidos antimicrobianos não lixiviantes. Além disso, suas condições de teste imitam de perto o desgaste em condições reais. Isso o torna o método mais preciso para testes têxteis disponível atualmente.
Especialistas dizem que o método de absorção será crucial para futuros testes têxteis.
Os padrões comuns para testes quantitativos incluem:

• Método de teste AATCC 100 (Avaliação quantitativa da redução bacteriana)
• JIS L1902-8:1998 (método de teste quantitativo)
• FZ / T 02021-92
• Teste de Quinn modificado
• ASTM E2149-2001 (Método de teste dinâmico para a atividade antimicrobiana de agentes imobilizados)
• GB/T 20944.2-2007 (Avaliação da atividade antibacteriana de tecidos, Parte 2: Método de absorção)

O principal benefício das ferramentas quantitativas de teste têxtil é a sua precisão. Elas também são objetivas e reprodutíveis. No entanto, exigem mais tempo e custos mais elevados em comparação com as abordagens qualitativas.
Nesta seção, detalharemos vários métodos comuns de testes quantitativos de têxteis.

Método de teste AATCC 100

AATCC 100: Um padrão clássico para testes têxteis antibacterianos

A AATCC, ou Associação Americana de Químicos e Coloristas Têxteis, criou o Método de Teste 100 em 1961. Ele foi revisado em 1965 e 1981. Atualmente, é um padrão fundamental para testar a resistência de tecidos a bactérias. Ele permite a avaliação quantitativa da eficácia bacteriostática e bactericida em tecidos antimicrobianos.

As bactérias se espalharam tanto no tecido tratado (teste) quanto no tecido não tratado (controle). Após um tempo de incubação definido, adicionamos uma solução neutralizante. Em seguida, agitamos as amostras vigorosamente para remover as bactérias viáveis ​​restantes. Medimos a contagem bacteriana no eluente com métodos de contagem em placas. Em seguida, calculamos a redução percentual comparando essa contagem com a amostra de controle.
Limitações do método original:

• Número limitado de amostras por teste
• Procedimento demorado
• Inadequado para avaliar tecidos antimicrobianos não lixiviantes
• Falta de especificidade na composição da solução neutralizante
• A suspensão bacteriana rica em nutrientes pode não refletir as condições reais de desgaste
• Grandes recipientes de teste dificultam o manuseio

AATCC 100 aprimorado: mais eficiente e adequado para tecidos antimicrobianos modernos

Pesquisadores criaram uma versão aprimorada do AATCC 100. Eles usaram insights de testes realizados no país e no exterior para aprimorá-lo. Este novo método é uma estrutura robusta para testes têxteis. Ele pode avaliar diversos tipos de materiais têxteis antimicrobianos.
As principais modificações incluem:

• Reduzir o tamanho da amostra de tecido de um círculo de 4.8 cm de diâmetro para um quadrado de ~1.8 cm
• Usando balões cônicos de 30 mL ou 50 mL com tampas
• Substituição do caldo AATCC por solução salina fisiológica fria a 0.85% (0–4°C) para suspensão bacteriana
• Diluição do inóculo bacteriano de ~10⁸–10⁹ UFC/mL para 1×10⁵–2×10⁵ UFC/mL
• Usando 20 mL de solução salina fria a 0.85% como enxágue neutralizante

Os pesquisadores calculam a eficácia antibacteriana da seguinte forma:

Este método aprimorado funciona tanto para tecidos antimicrobianos lixiviantes quanto não lixiviantes. Suas condições nutricionais correspondem melhor às encontradas durante o uso real do tecido. Oferece um método sólido e prático para testes têxteis modernos. Cada vez mais, laboratórios em todo o mundo o utilizam em seus protocolos de teste.

JIS L1902-8 (1998) Método de teste quantitativo

Acadêmicos japoneses aprimoraram o Método de Teste AATCC 100. Eles criaram novas maneiras de contar bactérias, testar o crescimento bacteriano e usar placas de ágar. Eles modificaram os testes de inibição bacteriana e aprimoraram o AATCC 100. O Comitê de Padrões Industriais do Japão atualizou a norma JIS L1902-1990. Eles criaram a nova norma JIS L1902-1998 para testar tecidos antimicrobianos. Este método apresenta uma maneira clara e uniforme de avaliar a resistência dos tecidos a bactérias no Japão. Ele também apoia o esforço global para criar padrões confiáveis ​​de teste para tecidos.

Método de teste FZ/T 02021-92

A norma FZ/T 02021-92 é uma diretriz da indústria têxtil chinesa. Ela explica como testar o desempenho antibacteriano de tecidos. Coloque o tecido de teste e o tecido de controle em frascos cônicos separados. Use dois frascos para as amostras de teste e um para o controle. Adicione primeiro a solução bacteriana indicadora. Em seguida, limpe as amostras de controle e de teste de zero hora usando um tampão. Em seguida, meça a contagem bacteriana. O técnico incuba as amostras de teste na temperatura correta por 20 horas. Em seguida, os pesquisadores as lavam com a solução tampão. Por fim, os pesquisadores medem a contagem bacteriana. Calcule a porcentagem de redução bacteriana comparando as contagens realizadas antes e depois da incubação.

Este método faz parte do compromisso da China com altos padrões de testes têxteis. Ele verifica a eficácia dos materiais têxteis no combate a bactérias em diversos usos. Este método demonstra a fabricantes e pesquisadores que os tratamentos antimicrobianos são eficazes em tecidos.

Método de teste de Quinn modificado

Princípio: Este método utiliza uma quantidade definida de suspensão bacteriana no tecido de teste. Dessa forma, as bactérias entram em contato total com a superfície têxtil. Após o tempo de exposição definido, adicione um meio nutriente à amostra. Isso permite o crescimento de quaisquer bactérias sobreviventes. Verificamos a eficácia do tecido na eliminação de bactérias. Fazemos isso medindo a queda de bactérias vivas. As colônias bacterianas (UFCs) são contadas com uma lente de aumento. Este método é uma maneira simples e eficaz de testar a eficácia de um tecido na inibição do crescimento microbiano após o contato.

Método de teste ASTM E2149–2001

O método ASTM E2149-2001 é um teste de frasco agitado. É simples e fácil de usar, especialmente quando comparado aos métodos baseados em absorção. Essa técnica utiliza uma suspensão bacteriana. Você mergulha a amostra de tecido nela e agita suavemente para manter o contato. É perfeito para tecidos antimicrobianos lixiviáveis ​​e não lixiviáveis. Além disso, não há restrição à quantidade de água que o material pode absorver. Pode conter diferentes tipos de tecidos, incluindo pós, penas, tecidos irregulares e amostras com formatos estranhos.

Este método funciona com tecidos. Também se aplica a pós, grânulos e materiais sólidos tratados. Seu amplo escopo e fácil utilização o tornam a melhor escolha para testar o desempenho antimicrobiano com ferramentas têxteis padrão.

GB/T 20944.2-2007 Têxteis — Teste de atividade antibacteriana: Parte 2 Método de absorção

Esta norma nacional apresenta o novo método chinês para testar a resistência de tecidos a bactérias. O princípio do teste é simples. Primeiro, inocula-se a amostra de teste. Em seguida, inocula-se também a amostra de controle com uma suspensão bacteriana. São realizados dois procedimentos. O primeiro elui imediatamente após a inoculação. O segundo elui após a incubação sob condições específicas. Medimos o número de bactérias viáveis ​​nas soluções eluídas. Em seguida, calculamos o valor antibacteriano ou a taxa de inibição. Isso nos ajuda a avaliar a eficácia do tecido contra bactérias.

Este método é muito preciso. Funciona tanto para tecidos antimicrobianos lixiviantes quanto para tecidos não lixiviantes. Portanto, é uma escolha confiável para testar tecidos inteligentes.

Principais fatores que influenciam os métodos de teste antibacteriano para têxteis

Esta seção discute dois métodos principais de teste: o método do frasco agitado e o método de absorção.

Principais fatores que afetam os resultados do teste de frasco agitado

A precisão e a confiabilidade do método do frasco agitado dependem de alguns fatores principais.

Os principais fatores são:

• Cepas bacterianas
• Agentes de lavagem
• Passos de lavagem
• Parâmetros de teste

Os critérios para medir a eficácia do agente antibacteriano.

Teste de cepas bacterianas

Microrganismos da mesma espécie podem ter origens diferentes. Essas diferenças podem afetar sua sensibilidade ao tecido tratado com antimicrobianos. Como resultado, os valores antibacterianos podem variar. Portanto, recomendamos o uso de cepas bacterianas padrão para garantir a consistência.

O crescimento bacteriano tem um padrão comum.

Possui quatro fases:

• Fase de atraso
• Fase de crescimento logarítmico (exponencial)
• fase estacionária
• Fase de declínio

A duração de cada fase varia entre as espécies bacterianas. Por exemplo, Staphylococcus aureus é uma cepa frequentemente utilizada em testes antibacterianos têxteis. Ela se multiplica a uma taxa muito mais lenta do que Escherichia coli ou Klebsiella pneumoniae. Os resultados podem variar de acordo com o estágio de crescimento da bactéria. Sua atividade metabólica muda em cada fase.

Detergentes e métodos de lavagem

Geralmente, é necessário pré-lavar a amostra antes do teste. Isso se aplica a menos que o tecido seja descartável ou não precise ser lavado para uso. Esta etapa tem duas funções: remover poeira e sujeira do tecido e remover agentes antimicrobianos extras.

O tipo de detergente e sua eficácia de enxágue podem ter um impacto significativo nos resultados dos testes. Portanto, precisamos padronizar o procedimento de lavagem e a formulação do detergente. Sem essa padronização, os resultados de diferentes instituições de teste podem não ser comparáveis.

Parâmetros de teste

A temperatura é um fator crítico que influencia o crescimento microbiano. Em baixas temperaturas, as bactérias param de crescer. À medida que a temperatura aumenta, as reações químicas e enzimáticas nas bactérias se aceleram. Isso leva a um crescimento bacteriano mais rápido. A maioria das bactérias nesses testes é mesófila. Elas crescem melhor a cerca de 37 °C.

A reprodução bacteriana é altamente sensível a mudanças de temperatura. Portanto, o controle da temperatura é essencial em testes de tecidos antimicrobianos. O único padrão com temperatura de incubação de (24 ± 1) °C é o "Tecidos de Malha Antibacterianos". Todos os outros padrões utilizam 37 °C.

Os pesquisadores devem padronizar as temperaturas de incubação para garantir a comparabilidade entre os métodos de teste.

Outros parâmetros do teste podem alterar os resultados. Os principais fatores incluem:

• Concentração bacteriana
• Viabilidade bacteriana
• Disponibilidade de nutrientes
• Tempo de contato com bactérias
• Método de incubação
• Duração da incubação

Estabelecer parâmetros de teste uniformes melhora tanto a repetibilidade intralaboratorial quanto a comparabilidade interlaboratorial.

Determinação da eficácia antibacteriana

Atualmente, a eficácia antibacteriana é normalmente expressa como uma redução percentual ou como um valor de redução logarítmica. Valores percentuais são fáceis de entender. No entanto, muitas vezes, eles não identificam diferenças importantes no desempenho antibacteriano. Por exemplo: 90%, 99%, 99.9%, 99.99%, 99.999%. Cada 9 a mais após a vírgula decimal significa um aumento de dez vezes, mesmo que os números pareçam próximos. Além disso, os relatórios de testes frequentemente arredondam os valores para uma casa decimal. Isso dificulta a visualização das diferenças.

Como as bactérias se reproduzem exponencialmente, a representação percentual nem sempre é cientificamente apropriada. Valores de redução logarítmica (como 1, 2, 3, 4, 5) mostram diferenças claras no desempenho antibacteriano. No entanto, pessoas não especializadas podem ter dificuldade em compreendê-los.

Precisamos pensar no meio ambiente e na segurança. Portanto, não devemos apenas perseguir taxas antibacterianas altíssimas. A maioria dos tecidos antibacterianos entra em contato com a pele humana e é lavada com frequência. Portanto, precisamos garantir que sejam seguros e duráveis.

A Norma Taiwanesa CNS 14945 analisa a eficácia dos tecidos no combate a bactérias. Os candidatos devem apresentar relatórios de segurança e toxicidade. Somente então poderão testar o desempenho antimicrobiano dos tecidos. Estes incluem:

• Um relatório de teste de irritação da pele (pH < 2) e um teste de alergenicidade sem reações alérgicas em animais.
• Um relatório de toxicidade aguda oral para aditivos inclui um relatório certificado por laboratório. Este não demonstra mortes ou problemas em camundongos com doses superiores a 1,000 mg/kg.
• Ou um relatório de teste de terceiros e declaração fornecida pelo fornecedor de matéria-prima.

É possível flexibilizar as regras de segurança para produtos que as pessoas não lavam ou tocam com o corpo. Portanto, precisamos estabelecer padrões claros de desempenho antimicrobiano para tecidos com base em como o produto é usado.

Fatores-chave que afetam a eficácia do método de absorção

Os resultados dos testes do método de absorção dependem de fatores importantes. Esses fatores incluem a preparação da suspensão bacteriana, a amostra de controle, a pesagem da amostra de teste e o tempo de incubação. Esses elementos desempenham um papel decisivo no sucesso do experimento.

Preparação da Suspensão Bacteriana

O primeiro passo no teste de tecidos antimicrobianos é preparar a suspensão bacteriana. Esta etapa é crucial. Ela afeta diretamente o crescimento das bactérias durante o experimento. Dois métodos principais são utilizados atualmente. O primeiro é o método de duas etapas, que segue o padrão americano AATCC 100. O segundo é o método de três etapas, baseado no padrão japonês JIS L 1902.

O método de duas etapas envolve:

• Utilize uma alça de inoculação para semear bactérias de uma cultura armazenada em uma placa de ágar nutriente. Em seguida, incube a placa a 37 °C por um tempo determinado.
• Selecione uma colônia típica da placa de ágar. Em seguida, adicione-a a um caldo nutritivo. Incube esse caldo a 37 °C por um tempo determinado.
• A suspensão bacteriana resultante é então diluída até a concentração necessária para o teste.

O método de três etapas acrescenta mais uma etapa:

Retire parte da suspensão bacteriana da segunda etapa e coloque-a em um novo caldo nutriente. Incube a 37 °C. Após esse tempo, dilua a cultura até a concentração desejada.

Importância da viabilidade bacteriana em testes de tecidos antimicrobianos

Em testes antimicrobianos em tecidos, é importante usar bactérias com alta viabilidade. Isso ajuda a demonstrar a eficácia do tecido no combate a micróbios. Verificamos a viabilidade bacteriana durante os testes. Fazemos isso comparando o crescimento em amostras de controle antes e depois da incubação. Se as bactérias se desenvolvem bem, elas são mais viáveis. Mas se o crescimento for limitado, elas apresentam menor atividade.

Métodos de cultura em duas etapas versus métodos de cultura em três etapas

A Tabela 2 apresenta dados experimentais sobre os métodos de duas e três etapas. Os resultados mostram que o método de três etapas aumenta a viabilidade bacteriana na suspensão. Isso é especialmente verdadeiro para Staphylococcus aureus, que tende a crescer em um ritmo gradual. Para Escherichia coli, que geralmente é altamente ativa, a diferença é mínima.

Efeitos específicos da cepa na viabilidade

O método de três etapas reduz o risco de usar cepas fracamente preservadas. Também garante melhores resultados, fornecendo uma imagem mais clara do desempenho antimicrobiano têxtil. Exige mais tempo e esforço do que o método de duas etapas, pois possui três estágios de cultura. Para bactérias ativas como E. coli, a etapa extra pode não ser necessária. O método de duas etapas pode produzir resultados semelhantes. Isso ocorre quando o crescimento bacteriano na amostra de controle atinge a taxa necessária.

Escolha o método correto com base na cepa bacteriana para melhor eficiência.

Amostra de controle

A escolha da amostra de controle é fundamental nos testes antimicrobianos. Isso ocorre porque comparamos o desempenho antimicrobiano com o controle. O crescimento bacteriano na amostra de controle afeta a avaliação antimicrobiana final. Alguns métodos utilizam o mesmo tecido da amostra de teste. No entanto, eles não incluem nenhum agente antimicrobiano. Isso serve como um controle. Este método é principalmente para fabricantes. Funciona bem em ensaios de otimização de processos. Mas não é prático para testes comerciais. As empresas geralmente não conseguem fornecer amostras de controle correspondentes quando as enviam.

Para facilitar os experimentos e a comparação dos resultados, precisamos escolher uma amostra de controle que funcione para a maioria dos itens têxteis testados. Têxteis antimicrobianos geralmente são itens como meias e roupas íntimas. Eles são projetados para se ajustarem perfeitamente à pele. Por esse motivo, o tecido de suporte de algodão do GB 7565-287 foi escolhido como amostra de controle para o teste de solidez da cor.

Testes preliminares no tecido de algodão não lavado apresentaram resultados estranhos. Após 19 horas de incubação, as contagens bacterianas da diluição 10 vezes foram surpreendentes. Isso sugere que pode haver erros nas leituras da concentração bacteriana.

Quantidade de amostra

A quantidade de amostra utilizada tem um efeito significativo nos resultados do teste. Isso ocorre porque a etapa de lavagem remove bactérias vivas do tecido. Mas também pode remover os agentes antimicrobianos presentes no tecido. Mais tecido significa que mais agentes antimicrobianos são adicionados à solução de lavagem. Esses agentes podem impedir o crescimento de bactérias no líquido de lavagem. Isso ajuda a reduzir o número de bactérias vivas no final.

Amostras maiores podem apresentar contagens bacterianas mais baixas. Isso faz com que o efeito antimicrobiano pareça mais forte. No entanto, isso não representa fielmente o desempenho real do tecido. Portanto, é crucial padronizar a quantidade de amostra. Isso garantirá resultados confiáveis ​​e consistentes nos testes antimicrobianos.

Tempo de incubação

O tempo de incubação é o tempo que as bactérias levam para crescer e se reproduzir. Isso ocorre em condições normais até que o número de células vivas atinja o máximo. Especialistas consideram dezoito horas como a duração ideal em teoria. Os métodos padrão atuais diferem um pouco nesse aspecto. Alguns sugerem 18 a 24 horas, enquanto outros especificam 18 ± 1 hora ou 20 ± 2 horas. Ainda assim, todos se enquadram na faixa geral de 18 a 24 horas.

 

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